中药鉴定学学习笔记 中药的鉴定

中药鉴定常用的方法有：来源（原植物、原动物和矿物）鉴定、性状鉴定、显微鉴定及理化鉴定等方法。各种方法有其特点和适用对象，有时还需要几种方法配合进行工作，这要根据检品的具体条件和要求灵活掌握。
一、来源（原植物、原动物和矿物）和品种鉴定
    应用植（动）物的分类学知识，对中药的来源进行鉴定，确定其正确的学名；应用矿物学的基本知识，确定矿物中药的来源。以保证在应用中品种准确无误。来源鉴定的内容包括：原植（动）物的科名、学名，药用部位；矿物药的类、族、矿石名或岩石名。原植物鉴定的步骤如下：
    1．观察植物形态  应注意检品的根、茎、叶、花和果实等部位的观察，其中对繁殖器官（花、果或孢子囊、子实体等）尤应仔细观察。在实际工作中经常遇到的检品是不完整的，一般都要追究其原植物，包括深入到产地调查，采集完整植物，进行对照鉴定。
    2．核对文献  根据已观察到的形态特征和检品的产地、别名、效用等线索，可查阅全国性或地方性的中草药书籍和图鉴，加以分析对照。在核对文献时，首先应查考植物分类学著作，如《中国植物志》、《中国高等植物图鉴》等，其次再查阅具有中药品种方面的著作，如《中药志》、《中药材品种论述》、《中药鉴别手册》等。必要时，还须进一步查对原始文献，以便正确鉴定。
    3．核对标本  当知道未知种是什么科属时，可以到标本室核对已定学名的该科属标本，或根据文献核对正确可靠的已定学名的某种标本。如有条件，能与模式标本（发表新种时所被描述的植物标本）核对，这对正确鉴定更为有利。对一些难以定名的标本，可寄请专家或植物分类研究单位协助鉴定。
二、性状鉴定
    就是用眼观、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试等方法来鉴别药材的外观性状，这些方法在我国医药学宝库中积累了丰富的传统鉴别，它具有简单、易行、迅速的特点。性状鉴定与来源鉴定一样，除仔细观察样品外，有时亦需核对药材标本和文献。性状鉴定是中药鉴定工作者必备的基本功之一。性状鉴定的内容，一般包括以下方面：
    1．形状  是指干燥药材的形态。药材的形态与药用部位有关，每种药材的形状一般比较固定，老药工有许多描述形状特征的鉴别术语，如防风的“蚯蚓头”、海马的“马头蛇尾瓦楞身”，形象而生动，易懂易记。观察形状时一般不需预处理，如观察很皱缩的全草，叶或花类，可先浸湿使软，展平。观察某些果实、种子时，如有必要可浸软后，取下果皮或种皮，以观察内部特征。
    来源中规定完整药材和产地加工片(段、块)的，可先描述完整药材，再描述产地加工片(段、块)。如只规定产地加工片（段、块）的可不描述完整药材。
    描写时对形状较典型的用“形”，如牛膝呈细长圆柱形等；类似的用“状”，必要时可用“×形×状”。如五倍子的肚倍：呈长圆形或纺锤形囊状。形容词一般用长、宽、狭，如长圆形，宽卵形，狭披针形等。
    2．大小  是指药材的长短、粗细（直径）和厚薄。一般应测量较多的样品，可允许有少量高于或低于规定的数值。测量时可用毫米刻度尺。对细小的种子，可放在有毫米方格线的纸上，每10粒种子紧密排成一行，测量后求其平均值。
描述时一般写为“××～××cm”，不足1cm的用“mm”。叶及花类药材一般用长、宽表示；根、根茎、茎、果实类药材一般用长、直径；鳞茎一般用高、直径；种子类一般用长、宽或长、直径。
    3．颜色  各种药材颜色是不相同的，色泽变化与药材质量有关，如黄芩主要含黄芩甙、汉黄芩甙等，如保管或加工不当，黄芩甙在黄芩酶作用下水解成葡萄糖醛酸与黄芩素，黄芩素具有三个邻位酚羟基，易氧化成醌类而显绿色，黄芩变绿后质量降低。又如黄连以断面红黄色者为佳。这些均说明药材的色泽是衡量药材质量好坏的重要因素。
    一般应在日光灯下观察，色泽的描述包括下述的表面和断面色泽的内容。描写色泽时应注意药材颜色往往不是单一的，而是复合的，或有的略有不同，因此可写为“××色或××色”；“××色至××色”。一般把质量好的色泽放在前面，二种色调组合描写的应以后一种色为主，如黄棕色即以棕色为主，色泽描述避免用各地理解不同的术语，如“青色”、“土黄色”，“粉白色”等。
    4．表面特征  是指药材的表面是光滑还是粗糙，有无皱纹、皮孔或毛茸等。如党参“根头下有致密的环状横纹，向下渐稀疏，有的达全长的一半。”骨碎补“表面密被深棕色至暗棕色的小鳞片，柔软如毛，经火燎者呈棕褐色或暗褐色，两侧及上表面均具凸起或凹下的圆形叶痕，少数有叶柄残基及须根残留”。观察表面特征时，样品一般不作预处理。
    5．质地  指药材的软硬、坚韧、松脆、。粉性等特征，常用的术语有松泡、粉性、油润、角质、体重质坚硬、脆、松脆、质韧、质柔软、体轻质松软、质硬而柔润有粘性、肉质、富糖性等。
    6．折断面  指药材折断时的现象和状态，如易折断或不易折断，折断时有无粉尘飞扬及断面特征是否平坦或显纤维性、颗粒性，裂片状，层层剥离，粗糙疏松，角质样，胶质样，富粉性、油润性，光泽等。根及根茎类或茎类还可观察其皮部与木部构比例，纤维束的排列形状，射线的分布、油室等，如牛膝断面平坦，黄棕色，微呈角质样而油润，中心维管束木部较大，黄白色，其外围散有多数点状的维管束，排列成2～4轮，又如华山参：质硬，断面类白色或黄白色，皮部狭窄，木部宽广，可见细密的放射性纹理，延胡索：质硬而脆，断面黄色角质样，有蜡样光泽；苍术：质坚实，断面黄白色或灰白色，散有多数橙黄色或棕红色油室，暴露稍久，可析出白色细针状结晶。如不易折断可用切断或破碎后观察断面特征和断面的颜色；如折断面不易观察到纹理，可削平后进行观察。
    7．气  有些药材有特殊的香气或臭气。主要是含挥发油之故。检查气味时，可直接嗅闻，气不明显的药材，可采用切碎后手搓揉或热水浸泡一下，有的可点燃后闻，如沉香。
    8．味  药材性状所指的味是鉴别药材时口尝的实际滋味。它与四气五味的味不能等同。药材的味与其含有的成分有关，也是衡量质量的一个方面，检查味感时，可取少量直接口尝，或加开水浸泡后尝浸出液，尝味时应注意：由于舌尖部只对甜味敏感，近舌根部对苦味敏感，所以尝味时要取少量在口里咀嚼约1分钟，是舌头的各部分都接触到药液，同时要注意取样的代表性，因为药材的各部分味感可能不同。有强烈的刺激性和毒性的药材，如需尝味时，应注意防止中毒。
    9．水试  有些药材在水中或遇水能产生特殊的现象，可作为鉴别特征之一。如西红花、秦皮、葶苈子、熊胆等，这些特殊现象常与药材中所含的化学成分或组织构造有关。
    10．火试  有些药材用火烧之，能产生特殊的气味、颜色、烟雾、闪光和响声等现象，可作为鉴别特征之一。如降香、麝香、海金砂等。
   
三、显微鉴定
（一）中药材的显微鉴定
    显微鉴定是利用显微镜来观察药材的组织构造、细胞形状、内含物的特征，以及显微化学反应用以鉴别药材的真伪与纯度以及中成药的显微鉴定。显微鉴定时可根据检品的情况（完整药材、破碎药材、粉末等）制作相应的制片，进行显微观察。
    1．完整药材的显微鉴定
    2．破碎药材的显微鉴定
    3．粉末药材的显微鉴定
（二）中成药的显微鉴定
（三）电镜
    电子显微镜（简称电镜）是以电子束为光源，利用电磁透镜成像，并与一定的机械装置和高真空技术相结合，所构成的现代化、综合性精密电子光学仪器。扫描电镜是其中的一个基本类型。扫描电镜的分辨率较高，一般为1～6nm，放大倍数一般在15～40万倍之间。扫描电镜广泛应用于生物样品表面及其断面立体形貌的观察，样品的制备方法较为简单，如已经充分干燥过的植物样品，可用无水乙醇或丙酮清洁后，镀金膜，直接观察。扫描电镜在中药鉴定中已被广泛应用，如对花粉粒的观察。
四、理化鉴定
    理化鉴定是利用某些物理的、化学的或仪器分析方法，分析药材中所含的有效成分或主要化学成分的有无和含量的多少，鉴定药材的真实性、纯度和品质优劣程度。主要的理化鉴定方法有：
    1．物理常数的测定  包括比重、旋光度、折光率、硬度、粘稠度、沸点、凝固点、熔点等的测定。这对挥发油类、油脂类、树脂类、液体类药（如蜂蜜等）和加工品类（如阿胶等）药材的真实性和纯度的鉴定，具有特别重要的意义。
    2．膨胀度的测定  药材中含有粘液质、果胶、树胶等成分，有吸水膨胀的性质，其吸水膨胀的程度和其所含的粘液等成正比关系。膨胀度为每1g药品在水或其他规定的溶剂中，在一定的时间和温度条件下膨胀后，所占有的体积毫升数。如北葶苈子不得低于12，南葶苈子不得低于3。
    3．色度检查  在贮藏过程中易变色、走油的药材，利用比色鉴别法，检查药材在贮藏过程中有色杂质的限量，了解和控制其走油变质的程度。
    4．泡沫指数和溶血指数的测定  利用皂素的水溶液振摇后能产生持久性的泡沫和溶解红血球的性质，可测定含皂素类成分药材的泡沫指数或溶血指数作为质量指标。
    5．微量升华  是利用中药中所含的某些化学成分，在一定温度下能升华的性质，获得升华物，在显微镜下观察结晶形状、色泽，或取升华物加试液观察反应。
    6．荧光分析  是利用中药中所含的某些化学成分，在紫外光或常光下能产生一定颜色的荧光的性质进行鉴别，将药材（包括断面、浸出物等）或经酸、碱处理后，置紫外光灯下观察所产生的荧光，紫外光灯的波长一般为254nm和365nm。
    7．显微化学分析  是将药材的切片、粉末或浸出物等置于载玻片上，加某些化学试剂后产生沉淀或结晶，在显微镜下观察其形状和颜色。
    8．蛋白电泳法  中药材中含有蛋白质、氨基酸的种类很多，特别是动物药类和果实种子药类，用聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳法，操作简便，重现性好，结果稳定可靠。
    9．化学定性分析  利用药材中的化学成分能与某些试剂产生特殊的颜色反应或沉淀反应来检识。一般在试管中进行，亦有直接在药材切片或粉末上观察以了解该成分所存在的部位。
    10．化学定量分析
    11．水分测定  中药中含有过量的水分，不仅易霉烂变质，使有效成分分解，且相对地减少了实际用量而不能达到治疗目的。因此，控制中药中水分的含量对保证中药质量有密切关系。
     测定中药中水分的方法，《中国药典》1995年版规定有三种。烘干法、甲苯法和减压干燥法。供试品一般先经破碎成直径不超过3mm的颗粒或碎片，直径和长度在3mm以下的花类、种子和果实类药材，可不破碎。减压干燥法需先经2号筛。
（1）烘干法适用于不含或少含挥发性成分的药品。置供试品2～5g在恒重的扇形称瓶中，干燥温度为100～105℃，干燥5h，冷却30min，再干燥1h，称重差异不超过5mg。
（2）甲苯法适用于含挥发性成分的药品。
（3）减压干燥法适用于含有挥发性成分的贵重药品。干燥剂为新鲜五氧化二磷。放于减压干燥器中，减压至2.67kPa（20rnnHg）以下持续30min，室温放置24h，当内外压一致后，称重。
    目前有用红外线干燥器测定水分，仪器上装有称量指示，可直接读出干燥失重数量，方法较简便，但有一定误差。又有报道利用无水乙醇吸收药材中的水分，以甲醇作内标剂进行气相色谱分析测定药材中水分的方法，具有迅速、灵敏度高的优点。
    12．灰分测定  中药中的灰分，包括中药本身经过灰化后遗留的不挥发性无机盐类，以及中药表面附着的不挥发性无机盐类，即总灰分。各种中药在无外来掺杂物时，总灰分应在一定范围以内，故所测灰分数值高于正常范围时，表示有可能在加工或运输储存等环节中有其他无机物污染或掺杂。中药中最常见的无机物质为泥土、砂石等，测定灰分的目的是限制药材中的泥沙等杂质。它对保证中药的纯度具有重要意义。有些中药的总灰分本身差异较大，特别是组织中含草酸钙较多的中药，如大黄，测其酸 不溶性灰分，即加10%盐酸处理，得到不溶于10%盐酸的灰分。这就使总灰分中的钙盐等溶去，而泥土、砂石等主要是硅酸盐因不溶解而残留。这样就能较精确地反应中药的质量。测定方法除酸不溶性灰分外，亦可测定硫酸化灰分，即样品在炽灼前加一定浓度的硫酸适量处理，然后升温至600C灼烧灰化。
    13．浸出物测定  浸出物测定是选用水、乙醇或其他试剂对药材中可溶性物质进行测定。有冷浸法和热浸法。取样量称定后，精密加水或其他溶剂，浸后滤过，滤器应干燥。精密量取滤液蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器内冷后，迅速精密称定重量，计算之。
    14．挥发油含量测定  根据各药材的具体要求进行。
    15．色谱法  色谱法又称层析法，可根据分离方法分为：纸色谱法。薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、蛋白电泳等。
（1）薄层色谱法  薄层色谱法系将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，形成均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法在同板上所得的色谱图对比，并可用薄层扫描仪进行扫描，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。
（2）高效液相色谱法  用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定。
（3）气相色谱法  气相色谱法的流动相为气体，称为载气，注人进样口的供试品被加热气化，并被载气带入色谱柱，在柱内各成分被分离后，先后进入检测器，色谱信号用记录仪或数据处理器记录。用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定。
（4）纸色谱法  系以纸为载体，以纸上所含水分或其他物质为固定相，用展开剂进行展开的分配色谱。
    16．分光光度法  分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量的方法。分光光度法包括紫外分光光度法、红外分光光度法、原子吸收分光光度法及比色法。紫外与红外分光光度法常用的波长范围为：紫外光区为200～400nrn；可见光区为400～700nrn；红外光区为2.5～25μm（按波数计为4000～400cm-1）。
    17． 色谱光谱联仪分析法  气相色谱—质谱分析，加上计算机联用，可充分发挥气相色谱的高分离效能和质谱的高鉴别能力的特点，已得到广泛的应用，如辛夷、细辛、牡荆叶等挥发性成分的分析，一般都能分析出10多种至数十种单一成分和其含量。对9种辛夷的挥发油成分分析，共鉴定出69种化合物，分别测出了它们的百分含量。这为中药材的品质评价，提供了重要依据。
    18．有害物质的检查  近年来，中药质量分析的内容不断扩大，对中药中无机成分和有害、有毒成分的分析已引起重视。药物的有效和有害物质两者是同样重要的。中药中如果被污染了有害物质，如农药、霉菌和霉菌毒素及重金属等就会影响人民健康。现就毒性成分的检测分述如下：
（1）有机氯农药残留量的检测  农药的种类很多其中有机氯类农药中二二三（DDT）和六六六（BHC）是使用最久、数量最大的农药。由于它们用后在土壤或生物体中长期残留和蓄积而危害人体，故各国非常重视食品和药物中残留量的检测和限量问题。中药中有机氯类农药残留量的分析，一般用装有电子捕获器的气相色谱仪，以环氧七氯作内标剂进行气相分析测定。但由于分析用色谱仪及分析方法在一般基层尚无条件进行，故薄层半微量定量法，也可在基层推广作为药材中农药残留量的检测方法。
（2） 有机磷农药残留量的检测  利用某些有机磷农药，如敌百虫等对胆碱脂酶具抑制作用，且酶的基质（β-醋酸萘酯）水解产物能与特定显示剂（固蓝β-盐）结合呈紫色反应原理，在已有农药的薄层板上，其农药斑点部位因酶的活性被抑制，基质不被水解，不引起呈色反应，在紫色薄层板上衬出无色斑点，根据斑点大小，经扫描检测出农药的残留量。此法称薄层-酶抑制法。
（3）黄曲霉毒素的检查 世界各国对食品和药品中黄曲霉毒素的限量作了严格的规定。有关检测的方法主要是根据黄曲霉毒素中毒性最大的成分黄曲霉毒素B1B2和G1、G2的理化性质设计的，即它们能溶于氯仿、甲醇而不溶于己烷、乙醇和石油醚，在紫外光下（365nm）分别呈蓝色和黄绿色荧光，通过薄层色谱用黄曲霉毒素标准品对照，并根据斑点大小目测半定量。
（4） 重金属的检查 重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质，如铅。药典中收载重金属、砷盐限量及其他金属盐检查的中药主要是矿物药类，如石膏含重金属不得过百万分之十，含砷盐不得过百万分之二，少数挥发油，如薄荷油含重金属不得过百万分之十，个别加工品，如阿胶含重金属不得过百万分之三十，含砷盐不得过百万分之三等。

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